产品货号:
GS2243
中文名称:
柱式DNA胶回收试剂盒
英文名称:
Spin Column DNA Gel Extraction Kit
产品规格:
50次|100次
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒采用硅胶膜吸附技术,在特定的Binding Buffer存在条件下,吸附膜可选择性吸附最多10μg DNA,核甘酸、酶、矿物油和其它杂质等不会吸附到膜上,并可被Wash Solution洗涤去除。DNA片段可被Elution Buffer充分洗脱。
保存:常温(18~25℃)
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- 快速且经济。
- 回收率高(50~80%)。适于回收100bp~10kb的DNA片段。
- 有效去除污染物。纯化的DNA可用于测序、标记、限制性酶切、连接和转化等后续分子生物学实验。
- 无需苯酚/氯仿抽提或乙醇沉淀。
组分 | 50次 | 100次 |
Binding Buffer II | 30mL | 60mL |
Wash Solution | 12mL | 24mL |
Elution Buffer | 5mL | 10mL |
吸附柱及2mL收集管 | 50套 | 100套 |
保存:常温(18~25℃)
- 使用前,12mL Wash Solution中应加入48mL无水乙醇,24mL Wash Solution中应加入96mL无水乙醇。
如果Wash Solution的体积由于运输过程泄漏而不足12mL或24mL,需要重新测量其体积,并确定需要加入多少ml的无水乙醇(无水乙醇:Wash Solution=4:1)。 - Elution Buffer为2.0mM Tris-HCl,pH8.0~8.5。虽然也能使用TE buffer pH8.0或者水替代,但得率通常会减少20%左右。
- 用干净、锋利的手术刀从从琼脂糖凝胶中切下目的DNA片段。称量后放入1.5mL离心管中。
注意:尽量减少凝胶块体积,但同时目的DNA片段仍保留在凝胶块上。 - 琼脂糖凝胶浓度为1%,则每100μL体积的凝胶加入300μL的Binding Buffer II(100mg=100μL)。50~60℃温浴10min,间歇振荡混匀直到凝胶完全溶解。
注意:如果是高浓度的胶(>2.0%),每100mg凝胶加入600μL的Binding Buffer II。如果琼脂糖凝胶浓度在1.5%和2.0%之间,每100mg凝胶加500μL的Binding Buffer II。如果凝胶浓度在1.0%和1.5%之间,每100mg凝胶加入400μL的Binding Buffer II。DNA片段<500bp时,每100mg凝胶请额外加入200μL异丙醇。 - 将吸附柱放入2mL收集管中。将上述混合液转移至吸附柱。静置2min。10000rpm离心1min,倒掉收集管中液体。
- 加入500μL的Wash Solution,10000rpm离心1min。倒掉收集管中液体。
- 重复步骤4一次。
- 空吸附柱放回2mL收集管,10000rpm离心30 s,以除去残留的Wash buffer。
注意:为获得更高的DNA洗脱效率,将吸附柱室温放置10min或烘箱50℃烘5min,以使残留的乙醇彻底挥发。 - 将空吸附柱放入一个干净的1.5mL离心管中。在吸附膜中央加入30~40μL的Elution Buffer,50℃温浴2min。10000rpm离心1min以洗脱DNA。
注意:为使DNA被充分洗脱,可将Elution Buffer或者ddH2O在60℃加热再加入吸附柱。 - 将DNA溶液置于-20℃保存。
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